“уберкулез :

Ќавигаци€ :

ќбратна€ св€зь :

»ммунологические методы

ќценка состо€ни€ основных систем иммунитета, определение их клеточных структур, а также степени развити€ специфических иммунологических реакций могут помогать в решении р€да задач в клинике туберкулеза: активность процесса, характер течени€ заболевани€, дифференциальна€ диагностика. ”точнение иммунологического статуса больного важно перед оперативным вмешательством, а также при определении показаний к назначению иммуномодул€торов. »ммунологические методы примен€ют дл€ диагностики лекарственной непереносимости, возникающей в процессе химиотерапии. ƒл€ оценки иммунного статуса больных используют набор иммунологических методов: тесты оценки состо€ни€ “- и ¬-лимфоцитов и их субпопул€ций (особенно регул€торных) с количественной характеристикой и определением функциональной активности иммунокомпетентных клеток, определение сенсибилизированных к соответствующим антигенам “- и ¬-лимфоцитов или их продуктов (медиаторов и антител).

÷енную информацию могут дать исследовани€, направленные на обнаружение антигенов микобактерий или других микроорганизмов в таком наиболее доступном материале, как кровь [јвербах ћ. ћ. и др., 1984]. ¬ажное значение имеет определение факторов неспецифической реактивности, к которым относ€тс€, например, различные компоненты системы комплемента. Ўироко используютс€ также реакции дл€ определени€ функции фагоцитов (полинуклеаров и макрофагов, особенно альвеол€рных) при легочных заболевани€х, а также различных сывороточных белков, гормонов и др.

“есты количественной и функциональной оценки “-лимфоцитов и их субпопул€ций. –озеткообразование с бараньими эритроцитами. ”становлено, что розетки с эритроцитами барана образуют “-лимфоциты [„ередеев ј. Ќ., 1976;“опаа ћ. е1; а!., 1972 ], ƒл€ постановки данного теста выдел€ют лейкоцитарную массу путем отстаивани€ гепаринизированной или дефибринированной крови (спонтанное отстаивание или с добавлением желатина), затем лейкоциты осаждают центрифугированием либо лимфоциты выдел€ют из цельной крови центрифугированием в градиенте фиколл/гепак (уротраст, изопак, верографин). ѕосле этого лимфоциты соедин€ют с эритроцитами барана и через определенный срок инкубации готов€т мазки, которые фиксируют глутаровым альдегидом и окрашивают азурэозином (или просматривают в камере √ор€ева нативные препараты). ¬ препаратах определ€ют процент лимфоцитов, образовавших розетки с эритроцитами (не менее 3 эритроцитов, прикрепившихс€ к одному лимфоциту). –екомендуетс€ также пересчет количества розеткообразующих клеток в абсолютных показател€х (так как число лимфоцитов в крови при различной патологии, естественно, имеет большие колебани€). ¬ норме в крови обнаруживаетс€ 50Ч70% розеткообразующих “-клеток.

ƒл€ определени€ и подсчета “-лимфоцитов используют моноклональные антитела (ќ “ или других серий) против маркеров

“-лимфоцитов. ѕроба состоит из этапов добавлени€ моноклональных антител к взвеси лимфоцитов, антисыворотки против иммуноглобулинов, включающей, например, радиоактивную или флюоресцирующую метку, с последующей ее регистрацией.

–еакци€ стимул€ции “-лимфоцитов митогенами. ѕоказано, что р€д митогенов, в первую очередь таких, как фитогемагглютинин (‘√ј) и конканавалин ј (кон-ј), вызывают бласттрансформацию и митозы “-лимфоцитов [Ling ћ., 1975]. ƒл€ постановки теста с ‘√ј лейкоциты или лимфоциты выдел€ют описанным выше способом и затем культивируют в присутствии ми-тоге на в течение 72 ч. ѕо окончании культивировани€ готов€т мазки, которые окрашивают азурэозином или другим методом и определ€ют процент бластных клеток (молодых клеточных форм) и/или митозы. ¬ норме в культурах с ‘√ј обнаруживаетс€ 60Ч95% бластных клеток.

ƒругим способом оценки активации лимфоцитов под действием митогенов €вл€етс€ определение включени€ Ќ-тимидина (или других меченых предшественников нуклеиновых кислот или аминокислот) в ƒЌ . 3Ќ-тимин добавл€ют в культуры лимфоцитов за 2Ч12 ч до конца культивировани€. ѕосле инкубации клеточную массу отмывают, лизируют NaOH, гиамином или растворителем NCS (дл€ выхода включенной радиоактивности в жидкость), помещают в сцинтилл€ционную жидкость и определ€ют число импульсов в опыте (культура с ‘√ј) и контроле (без ‘√ј) в жидкостном сцинтилл€ционном счетчике (например, отечественный счетчик —Ѕ—).

–азделы

Ѕыстрый доступ :

√лавна€ «акладки  онтакт
√лавна€ «акладки  онтакты

ѕопул€рные статьи :


ѕоиск :


«акладки

ќдна нопка

 урсы валют :

USA ÷Ѕ 23.5125 0.1366

EUR ÷Ѕ 36.9381 -0.1688


Ќаши друзь€ :

Copyright © “уберкулез. Ѕорьба с туберкулезом
rss
–Ъ–∞—А—В–∞