“уберкулез :

Ќавигаци€ :

ќбратна€ св€зь :

ћетод посева

ћетод посева, или культуральный метод вы€влени€ микобактерий. Ётот метод отличаетс€ большой чувствительностью и имеет р€д преимуществ перед методом микроскопии. ќн позвол€ет вы€вить микобактерий туберкулеза при наличии в исследуемом патологическом материале нескольких дес€тков жизнеспособных особей. ≈сли сопоставить эту цифру с 10 000Ч100 000 микробных тел, присутствие которых необходимо в 1 мл материала дл€ бактериоскопического вы€влени€, то станет €сна значительно более высока€ чувствительность метода посева. Ёто особенно важно при исследовании материала от впервые вы€вленных или уже леченных больных, выдел€ющих малые количества микобактерий.

ќчень важным преимуществом метода культурального исследовани€ €вл€етс€ возможность получени€ культуры возбудител€, котора€ может быть подробно исследована, идентифицирована и изучена в отношении ее лекарственной чувствительности, вирулентности и других свойств. ќднако необходимо отметить, что существует р€д факторов, ограничивающих широкое применение метода культивировани€, в частности его высока€ стоимость, известные ограничени€, св€занные со сложностью обработки патологического материала, медленным размножением микобактерий туберкулеза и, следовательно, необходимостью долго ждать результатов исследовани€. ¬се это снижает ценность метода, не дает возможности оперативно использовать полученные результаты в клинике и диктует необходимость проведени€ широкого поиска как более совершенных методов, так и более совершенных питательных сред, которые позволили бы ускорить получение результатов и повысить эффективность и чувствительность метода.

Ѕактериологическому исследованию подвергаетс€ самый разнообразный материал: мокрота, промывные воды бронхов и желудка, экссудаты, отдел€емое ран и свищей, моча, спинномозгова€ жидкость, материалы биопсии и бронхоальвеол€рного лаважа, органы экспериментальных животных и патологоанатомический материал. ћатериал дл€ исследовани€ должен доставл€тьс€ в лабораторию в стерильной хорошо закрытой посуде. ѕеред посевом на питательные среды материал предварительно обрабатывают, что преследует дво€кую цель: 1) максимально гомогенизировать материал, подлежащий исследованию, с тем чтобы содержащиес€ в нем микобактерии равномерно распределились в его объеме, чем облегчаетс€ их выделение; 2) необходимо Ђподавитьї все другие микроорганизмы (гноеродные и гнилостные), содержащиес€ в материале исследовани€, с тем чтобы в дальнейшем они как более быстро растущие не мешали росту микобактерии и не использовали приготовленные дл€ микобактерии питательные вещества среды.

— этой целью дл€ обработки патологического материала перед посевом на питательные среды используют различные реактивы. Ёто должно обеспечивать гомогенизацию материала, полностью подавл€ть рост неспецифической гноеродной и гнилостной микрофлоры, котора€ может находитьс€ в исследуемом материале, и максимально сохран€ть жизнеспособность присутствующих в материале микобактерии. ѕеред посевом исследуемый материал нужно сконцентрировать и освободить от сопутствующей гноеродной микрофлоры. ƒл€ этого мокроту, экссудаты и другой материал помещают в стерильную скл€нку с бусами или битым стеклом и обрабатывают щелочью или кислотой. ∆идкие материалы предварительно центрифугируют, и дальнейшей обработке подвергают только осадок. ¬ насто€щее врем€ дл€ обработки патологического материала примен€ют следующие методы и детергенты.

1. ћетод √она Ч обработка растворами серной кислоты (2Ч6%) в зависимости от характера материала и степени его загр€зненности неспецифической микрофлорой с последующим центрифугированием и отмыванием.

2. ћетод ѕетрова Ч обработка 4% раствором bIаќЌ с последующим центрифугированием и нейтрализацией осадка перед посевом; этот метод удобно использовать при одновременной обработке большого количества посевов. ўелочь раствор€ет белковые частицы, что способствует быстрой гомогенизации мокроты и других материалов, содержащих гной и слизь, и высвобождению из этих белковых частиц микобактерии туберкулеза.

3. ќбработка 3% раствором серной кислоты в течение 20 мин (10 мин в спокойном состо€нии, 10 мин при центрифугировании) с последующим 3-кратным отмыванием осадка стерильным изотоническим раствором.

4. ќбработка 1% раствором серной кислоты после тщательной гомогенизации в течение 18Ч20 ч при комнатной температуре (метод Ѕ. я. ÷иммер).

5. ќбработка 10% раствором трехзамещенного фосфата натри€. Ёто широко распространенный в нашей стране метод, допускающий длительную экспозицию материала с фосфатом натри€ без нарушени€ жизнеспособности микобактерии, что особенно ценно в тех случа€х, когда доставка материала затруднена. “рехзамещенный фосфат натри€ хорошо угнетает сопутствующую флору и даже при 2Ч3-дневном хранении материала не повреждает микобактерии и мало вли€ет на их способность к росту на питательных средах.

ћетод можно примен€ть в двух модификаци€х: с нейтрализацией материала или без нейтрализации. ¬ последнем случае к осадку после центрифугировани€ добавл€ют 1 мл жидкой среды Ўкольниковой и полученную смесь полностью засевают на питательные среды.

6. ѕри посеве сильно загр€зненного материала используют более концентрированные растворы серной кислоты (5%).

—ледует отметить, что поиски веществ, подход€щих дл€ обработки материала перед посевом, ведутс€ посто€нно. “ак, несколько лет назад было закончено коллективное исследование стран —Ё¬ по сравнительному испытанию подобных веществ. ¬ качестве детергентов испытывались различные соединени€: лауросепт X, некал ¬’, лаурилсульфат, хлоргексидин биглюконат и др. ќптимальные результаты были получены при применении лауросепта, который повысил на 16 % частоту выделени€ микобактерии туберкулеза. ќднако отсутствие этого детергента ограничивает возможности его широкого применени€ на практике.

Ѕыстрый доступ :

√лавна€ «акладки  онтакт
√лавна€ «акладки  онтакты

ѕопул€рные статьи :


ѕоиск :


«акладки

ќдна нопка

 урсы валют :

USA ÷Ѕ 23.5125 0.1366

EUR ÷Ѕ 36.9381 -0.1688


Ќаши друзь€ :

Copyright © “уберкулез. Ѕорьба с туберкулезом
rss
–Ъ–∞—А—В–∞